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NMT測試液標準

各指標測試液總要求

檢測指標 測試液要求
Cl-  不能添加NO3-
 Na+  添加K+濃度時需低于Na+濃度10倍
 Cu2+  不能添加Cl-
 Pb2+  不能添加Cl-
 NH4+  不能添加K+
 Mg2+  建議不添加Cd2+和Ca2+,如需添加則需要低于Mg2+濃度10
 Cd2+  添加Ca2+濃度不能高于Cd2+

植物根系

適用于植物根系等直接接觸培養(yǎng)環(huán)境的組織

檢測指標 測試液成分
H+  xx mM CaCl2,0.3mM MES ,pH6.0
 K+ xx mM KCl,0.1mM CaCl2,pH6.0
 Na+  xx mM NaCl,0.1mM CaCl2,pH6.0
 Ca2+  xx mM CaCl2,pH6.0
 Cl- xx mM KCl,0.1mM CaCl2,pH6.0
 NH4+  xx mM NH4Cl,0.1mM CaCl2,pH6.0
 NO3-  0.1mM CaCl2,xx mM NaNO3,pH6.0
  Cd2+  xx mM CdCl2,xxmM CaCl2,pH6.0
 Pb2+  xx mM Pb(NO3)2,pH6.0
 Cu2+  xx mM Cu(NO3)2(也可使用CuSO4),pH6.0
  Mg2+  xx mM MgCl2,0.1mM CaCl2,pH6.0
 O2  0.1mM CaCl2,pH6.0
 H2O2  0.1mM CaCl2,pH6.0
IAA  0.1mM CaCl2,pH6.0
校正液及備注
(1)pH:植物組織測試液pH為6.0,特殊樣品以培養(yǎng)環(huán)境的pH為準。(如在pH7環(huán)境下培養(yǎng)/處理的樣品,可將pH設置為7)
(2)待測離子濃度與培養(yǎng)/處理環(huán)境中該離子濃度一致(如檢測Cd2+,培養(yǎng)環(huán)境為0.5 mM CdCl2,測試液可用0.5 mM CdCl2,pH6.0)檢測指標為分子時直接使用左側列表中對應的溶液。
(3)校正液:根據測試液中待測指標濃度,設置高于和低于測試液濃度的校正液,且高低校正液濃度一般相差10倍。(如K+測試液為0.5 mM KCl,pH6.0,校正液為1mM KCl,pH6.0/0.1mM KCl,pH6.0)

葉肉細胞,保衛(wèi)細胞,莖等

不直接接觸培養(yǎng)環(huán)境的樣品(如葉肉細胞,保衛(wèi)細胞,莖等)

檢測指標 測試液成分
H+ 0.1mM CaCl2,0.3mM MES ,pH6.0
 K+ 0.1mM KCl,0.1mM CaCl2,pH6.0
 Na+ 0.5mM NaCl,0.1mM CaCl2,pH6.0
 Ca2+ 0.1mM CaCl2,pH6.0
 Cl- 0.1mM KCl,0.1mM CaCl2,pH6.0
 NH4+ 0.1mM NH4Cl,0.1mM CaCl2,pH6.0
 NO3- 0.1mM CaCl2,0.1mM NaNO3,pH6.0
  Cd2+ 0.1mM CdCl2,0.1mM CaCl2,pH6.0
 Pb2+ 0.1mM Pb(NO3)2,pH6.0
 Cu2+ 0.1mM Cu(NO3)2,pH6.0
  Mg2+ 0.1mM MgCl2,0.1mM CaCl2,pH6.0
 O2 0.1mM CaCl2,pH6.0
 H2O2 0.1mM CaCl2,pH6.0
IAA 0.1mM CaCl2,pH6.0
校正液及備注

校正液:根據測試液中待測指標濃度,設置高于和低于測試液濃度的校正液,且高低校正液濃度一般相差10倍。(如K+測試液為0.1 mM KCl,pH6.0,校正液為0.5mM KCl,pH6.0/0.05mM KCl,pH6.0)

動物細胞

檢測指標:H+、K+、Na+、Ca2+、Cl-、NH4+、NO3-、Cd2+、 Pb2+、 Cu2+、 Mg2+、O2、H2O2

測試液成分:

測試液1:1.8 mM CaCl2,5.0 mM KCl,25 mM NaHCO3,100 mM NaCl,0.8 mM MgSO4,pH 6.8

測試液2:0.4 mM Ca(NO3)2,0.5 mM MgSO4,5.0 mM KCl,20 mM NaHCO3,100 mM NaCl,pH 6.8

測試液3:1.0 mM CaCl2,2.0 mM MgCl2,3.0 mM KCl,25 mM NaHCO3,100 mM NaCl,pH 6.8

 

校正液及備注:

(1)MEM、DMEM、IMDM、GMEM等相似培養(yǎng)基培養(yǎng)的細胞使用測試液1。

(2)RPMI-1640等相似培養(yǎng)基培養(yǎng)的細胞使用測試液2。

(3)Ham's F12等相似培養(yǎng)基培養(yǎng)的細胞使用測試液3。

(4)檢測NH4+、Cd2+、Pb2+、Cu2+時,在對應測試液1,測試液2,測試液3成份基礎上,加上待測離子成份即可。

(5)檢測Pb2+、Cu2+時,需要將Cl-更換為NO3-或者SO42-

(6)校正液:根據測試液中待測指標濃度,設置高于和低于測試液濃度的校正液,且高低校正液濃度一般相差10倍。

花粉管

檢測指標:Ca2+、H+、K+、Na+、Cl-、O2、H2O2、IAA

測試液成分:0.1 mM CaCl2, 0.1 mM KCl, 1.0 mM NaCl, 1.6 mM H3BO3, 0.3 mM MES, 5% sucrose, pH 5.8

注:檢測Cl-時,需要去除測試液中的NO3-

種子

檢測指標:Ca2+、H+、K+、Na+、Cl-、O2、H2O2、IAA

測試也成分:0.1 mM KCl, 0.1 mM CaCl2, 0.1 mM MgCl2, 0.5 mM NaCl, 0.2 mM Na2SO4, 0.3 mM MES, pH 6.0

注:檢測Cl-時,需要去除測試液中的NO3-

液泡、原生質體

檢測指標:Ca2+、H+、K+、Na+、Cl-、O2、H2O2、IAA

測試液成分:0.1 mM KCl, 0.1 mM CaCl2, 1.0 mM NaCl, 600 mM mannitol, 0.05mM MES, pH 6.0

注:檢測Cl-時,需要去除測試液中的NO3-

 

檢測指標:Cd2+

 

測試液成分 ** mM Cd2+(根據實驗Cd2+處理濃度定), 0.1 mM KCl, 0.1 mM CaCl2, 0.5 mM NaCl,600 mM mannitol, 0.05mM MES, pH 6.0

酵母細胞

檢測指標:Ca2+、H+、K+、Na+、Cl-

測試液成分:0.1 mM CaCl2, 0.1 mM KCl, 1.0 mM NaCl, 0.3 mM MES, 10 mM glucose, pH 6.0

注:檢測Cl-時,需要去除測試液中的NO3-

 

檢測指標:IAA、O2、H2O2

 

測試液成分: 酵母培養(yǎng)基稀釋100倍

硅藻(淡水)

檢測指標:Ca2+、H+、K+、Na+、Cl-、Mg2+、O2、H2O2、IAA

測試液成分:0.1 mM KCl, 0.1 mM CaCl2, 0.1 mM MgCl2, 0.5 mM NaCl, 0.3 mM MES, 0.2 mM Na2SO4, 0.1% sucrose, pH 7.8

注:檢測Cl-時,需要去除測試液中的NO3-

硅藻(淡水,BG11培養(yǎng)基)

檢測指標:Ca2+、H+、K+、Na+、Cl-、Mg2+、O2、H2O2、IAA

測試液成分:0.1 mM KCl, 0.2 mM CaCl2, 0.1 mM MgCl2, 15 mM NaCl, 0.3 mM MES, 0.2 mM Na2SO4, 0.1% sucrose, pH 7.8

注:檢測Cl-時,需要去除測試液中的NO3-

綠藻(淡水)

檢測指標:Ca2+、H+、K+、Na+、Cl-、Mg2+、O2、IAA

測試液成分:0.1 mM KCl, 0.1 mM CaCl2, 0.1 mM MgCl2, 0.5 mM NaCl, 0.3 mM MES, 0.2 mM Na2SO4, pH 7.1

注:檢測Cl-時,需要去除測試液中的NO3-

綠藻(海水)

檢測指標:H2O2、Ca2+、IAA

測試液成分:360mM NaCl, 2.0mM NaHCO3, 8.0mM KCl, 0.1mM Na2SO4, 0.1mM CaCl2, pH8.1

大腸桿菌

檢測指標:H+、K+、Na+

測試液成分:0.1 mM KCl, 1.0 mM NaCl, 0.1 mM HEPES, 1.0 mM glucose, pH 7.0

愈傷組織

檢測指標:H+、K+、Na+

測試液成分:1.0 mM NaCl, 0.1 mM KCl, 0.2 mM CaCl2, pH 6.0

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