NMT測試液標準
各指標測試液總要求
檢測指標 | 測試液要求 |
Cl- | 不能添加NO3- |
Na+ | 添加K+濃度時需低于Na+濃度10倍 |
Cu2+ | 不能添加Cl- |
Pb2+ | 不能添加Cl- |
NH4+ | 不能添加K+ |
Mg2+ | 建議不添加Cd2+和Ca2+,如需添加則需要低于Mg2+濃度10 |
Cd2+ | 添加Ca2+濃度不能高于Cd2+ |
植物根系
適用于植物根系等直接接觸培養(yǎng)環(huán)境的組織
檢測指標 | 測試液成分 |
H+ | xx mM CaCl2,0.3mM MES ,pH6.0 |
K+ | xx mM KCl,0.1mM CaCl2,pH6.0 |
Na+ | xx mM NaCl,0.1mM CaCl2,pH6.0 |
Ca2+ | xx mM CaCl2,pH6.0 |
Cl- | xx mM KCl,0.1mM CaCl2,pH6.0 |
NH4+ | xx mM NH4Cl,0.1mM CaCl2,pH6.0 |
NO3- | 0.1mM CaCl2,xx mM NaNO3,pH6.0 |
Cd2+ | xx mM CdCl2,xxmM CaCl2,pH6.0 |
Pb2+ | xx mM Pb(NO3)2,pH6.0 |
Cu2+ | xx mM Cu(NO3)2(也可使用CuSO4),pH6.0 |
Mg2+ | xx mM MgCl2,0.1mM CaCl2,pH6.0 |
O2 | 0.1mM CaCl2,pH6.0 |
H2O2 | 0.1mM CaCl2,pH6.0 |
IAA | 0.1mM CaCl2,pH6.0 |
校正液及備注 | |
(1)pH:植物組織測試液pH為6.0,特殊樣品以培養(yǎng)環(huán)境的pH為準。(如在pH7環(huán)境下培養(yǎng)/處理的樣品,可將pH設置為7) (2)待測離子濃度與培養(yǎng)/處理環(huán)境中該離子濃度一致(如檢測Cd2+,培養(yǎng)環(huán)境為0.5 mM CdCl2,測試液可用0.5 mM CdCl2,pH6.0)檢測指標為分子時直接使用左側列表中對應的溶液。 (3)校正液:根據測試液中待測指標濃度,設置高于和低于測試液濃度的校正液,且高低校正液濃度一般相差10倍。(如K+測試液為0.5 mM KCl,pH6.0,校正液為1mM KCl,pH6.0/0.1mM KCl,pH6.0) |
葉肉細胞,保衛(wèi)細胞,莖等
不直接接觸培養(yǎng)環(huán)境的樣品(如葉肉細胞,保衛(wèi)細胞,莖等)
檢測指標 | 測試液成分 |
H+ | 0.1mM CaCl2,0.3mM MES ,pH6.0 |
K+ | 0.1mM KCl,0.1mM CaCl2,pH6.0 |
Na+ | 0.5mM NaCl,0.1mM CaCl2,pH6.0 |
Ca2+ | 0.1mM CaCl2,pH6.0 |
Cl- | 0.1mM KCl,0.1mM CaCl2,pH6.0 |
NH4+ | 0.1mM NH4Cl,0.1mM CaCl2,pH6.0 |
NO3- | 0.1mM CaCl2,0.1mM NaNO3,pH6.0 |
Cd2+ | 0.1mM CdCl2,0.1mM CaCl2,pH6.0 |
Pb2+ | 0.1mM Pb(NO3)2,pH6.0 |
Cu2+ | 0.1mM Cu(NO3)2,pH6.0 |
Mg2+ | 0.1mM MgCl2,0.1mM CaCl2,pH6.0 |
O2 | 0.1mM CaCl2,pH6.0 |
H2O2 | 0.1mM CaCl2,pH6.0 |
IAA | 0.1mM CaCl2,pH6.0 |
校正液及備注 | |
校正液:根據測試液中待測指標濃度,設置高于和低于測試液濃度的校正液,且高低校正液濃度一般相差10倍。(如K+測試液為0.1 mM KCl,pH6.0,校正液為0.5mM KCl,pH6.0/0.05mM KCl,pH6.0) |
動物細胞
檢測指標:H+、K+、Na+、Ca2+、Cl-、NH4+、NO3-、Cd2+、 Pb2+、 Cu2+、 Mg2+、O2、H2O2
測試液成分:
測試液1:1.8 mM CaCl2,5.0 mM KCl,25 mM NaHCO3,100 mM NaCl,0.8 mM MgSO4,pH 6.8
測試液2:0.4 mM Ca(NO3)2,0.5 mM MgSO4,5.0 mM KCl,20 mM NaHCO3,100 mM NaCl,pH 6.8
測試液3:1.0 mM CaCl2,2.0 mM MgCl2,3.0 mM KCl,25 mM NaHCO3,100 mM NaCl,pH 6.8
校正液及備注:
(1)MEM、DMEM、IMDM、GMEM等相似培養(yǎng)基培養(yǎng)的細胞使用測試液1。
(2)RPMI-1640等相似培養(yǎng)基培養(yǎng)的細胞使用測試液2。
(3)Ham's F12等相似培養(yǎng)基培養(yǎng)的細胞使用測試液3。
(4)檢測NH4+、Cd2+、Pb2+、Cu2+時,在對應測試液1,測試液2,測試液3成份基礎上,加上待測離子成份即可。
(5)檢測Pb2+、Cu2+時,需要將Cl-更換為NO3-或者SO42-。
(6)校正液:根據測試液中待測指標濃度,設置高于和低于測試液濃度的校正液,且高低校正液濃度一般相差10倍。
花粉管
檢測指標:Ca2+、H+、K+、Na+、Cl-、O2、H2O2、IAA
測試液成分:0.1 mM CaCl2, 0.1 mM KCl, 1.0 mM NaCl, 1.6 mM H3BO3, 0.3 mM MES, 5% sucrose, pH 5.8
注:檢測Cl-時,需要去除測試液中的NO3-
種子
檢測指標:Ca2+、H+、K+、Na+、Cl-、O2、H2O2、IAA
測試也成分:0.1 mM KCl, 0.1 mM CaCl2, 0.1 mM MgCl2, 0.5 mM NaCl, 0.2 mM Na2SO4, 0.3 mM MES, pH 6.0
注:檢測Cl-時,需要去除測試液中的NO3-
液泡、原生質體
檢測指標:Ca2+、H+、K+、Na+、Cl-、O2、H2O2、IAA
測試液成分:0.1 mM KCl, 0.1 mM CaCl2, 1.0 mM NaCl, 600 mM mannitol, 0.05mM MES, pH 6.0
注:檢測Cl-時,需要去除測試液中的NO3-
檢測指標:Cd2+
測試液成分: ** mM Cd2+(根據實驗Cd2+處理濃度定), 0.1 mM KCl, 0.1 mM CaCl2, 0.5 mM NaCl,600 mM mannitol, 0.05mM MES, pH 6.0
酵母細胞
檢測指標:Ca2+、H+、K+、Na+、Cl-
測試液成分:0.1 mM CaCl2, 0.1 mM KCl, 1.0 mM NaCl, 0.3 mM MES, 10 mM glucose, pH 6.0
注:檢測Cl-時,需要去除測試液中的NO3-
檢測指標:IAA、O2、H2O2
測試液成分: 酵母培養(yǎng)基稀釋100倍
硅藻(淡水)
檢測指標:Ca2+、H+、K+、Na+、Cl-、Mg2+、O2、H2O2、IAA
測試液成分:0.1 mM KCl, 0.1 mM CaCl2, 0.1 mM MgCl2, 0.5 mM NaCl, 0.3 mM MES, 0.2 mM Na2SO4, 0.1% sucrose, pH 7.8
注:檢測Cl-時,需要去除測試液中的NO3-
硅藻(淡水,BG11培養(yǎng)基)
檢測指標:Ca2+、H+、K+、Na+、Cl-、Mg2+、O2、H2O2、IAA
測試液成分:0.1 mM KCl, 0.2 mM CaCl2, 0.1 mM MgCl2, 15 mM NaCl, 0.3 mM MES, 0.2 mM Na2SO4, 0.1% sucrose, pH 7.8
注:檢測Cl-時,需要去除測試液中的NO3-
綠藻(淡水)
檢測指標:Ca2+、H+、K+、Na+、Cl-、Mg2+、O2、IAA
測試液成分:0.1 mM KCl, 0.1 mM CaCl2, 0.1 mM MgCl2, 0.5 mM NaCl, 0.3 mM MES, 0.2 mM Na2SO4, pH 7.1
注:檢測Cl-時,需要去除測試液中的NO3-
綠藻(海水)
檢測指標:H2O2、Ca2+、IAA
測試液成分:360mM NaCl, 2.0mM NaHCO3, 8.0mM KCl, 0.1mM Na2SO4, 0.1mM CaCl2, pH8.1
大腸桿菌
檢測指標:H+、K+、Na+
測試液成分:0.1 mM KCl, 1.0 mM NaCl, 0.1 mM HEPES, 1.0 mM glucose, pH 7.0
愈傷組織
檢測指標:H+、K+、Na+
測試液成分:1.0 mM NaCl, 0.1 mM KCl, 0.2 mM CaCl2, pH 6.0