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鹽脅迫研究NMT標準化方案

鹽脅迫研究NMT標準化方案

 

一、視頻資源

二、參考文獻

C2019-006,周揚、江行玉,海南大學,BMC Plant Biology ,擬南芥,根部分生區(qū)(距離根尖120μm),Na+、H+
Co-expression of SpSOS1 and SpAHA1 in transgenic Arabidopsis plants improves salinity tolerance

C2019-022,謝潮添,集美大學,Algal research,紫菜,K+、Na+、H+

K+ and Na+ transport contribute to K+/Na+ homeostasis in Pyropia haitanensis under hypersaline stress


C2019-026,王瑋、王文強,山東農(nóng)業(yè)大學、棗莊學院,J of integr plant biol,小麥,根部分生區(qū),Na+、K+、H+

The involvement of wheat (Triticum aestivum L.) U-box E3 ubiquitin ligase TaPUB1 in salt stress tolerance

 

C2017-038,何正權(quán)、邱文敏 ,三峽大學、中國林業(yè)科學研究院亞熱帶林業(yè)研究所,Environ Exp Bot,擬南芥,根,Na+、H+

Overexpression of cysteine protease gene from Salix matsudana enhances salt tolerance in transgenic Arabidopsis

 

C2018-026,張國平,浙江大學農(nóng)學系,浙江省作物種質(zhì)資源重點實驗室,Plant Cell Physiol ,大麥,根部成熟區(qū),K+、Ca2+、H+

A Sodium Transporter HvHKT1;1 Confers Salt Tolerance in Barley via Regulating Tissue and Cell Ion Homeostasis

 

C2019-002,孫健、李宗蕓,江蘇師范大學,J Exp Bot ,甘薯,根,K+、H+、Ca2+、Na+

Root-zone-specific sensitivity of K+-and Ca2+-permeable channels to H2O2 determines ion homeostasis in salinized diploid and hexaploid Ipomoea trifida

 

C2019-004,陳少良,北京林業(yè)大學,New Phytol,楊樹,根(距離根尖300-400μm),NO3-

Amelioration of nitrate uptake under salt stress by ectomycorrhiza with and without a Hartig net

 

C2019-016,郭巖、楊永青,中國農(nóng)業(yè)大學,Nature Commun,擬南芥,根部分生區(qū),Na+、H+

Calcium-activated 14-3-3 proteins as a molecular switch in salt stress tolerance

 

C2019-020,李召虎,中國農(nóng)業(yè)大學,New phytol,棉花、擬南芥,根,Ca2+、K+、Na+

Phosphatase GhDsPTP3a interacts with annexin protein GhANN8b to reversely regulate salt tolerance in cotton (Gossypium spp.)

 

C2019-033,楊潤強,南京農(nóng)業(yè)大學,F(xiàn)ood and Chem Toxicol,大麥,Ca2+

Ca2+ involved in GABA signal transduction for phenolics accumulation in germinated hulless barley under NaCl stress

 

C2019-037,別之龍,華中農(nóng)業(yè)大學,J Exp Bot,距離根尖1mm,黃瓜幼苗, K+

Tissue-specific respiratory burst oxidase homologue -dependent H2O2 signaling to the plasma membrane H+-ATPase confers potassium uptake and salinity tolerance in Cucurbitaceae

 

C2018-009,別之龍/黃遠,華中農(nóng)業(yè)大學,J EXP BOT,葉脈/葉片/根,Na+/K+

Salt tolerance mechanisms in pumpkin species (Cucurbita)

 

C2017-026,別之龍,華中農(nóng)業(yè)大學,J EXP BOT,根/下胚軸,Na+/H+

Root respiratory burst oxidase homologue-dependent H2O2 production confers salt tolerance on a grafted cucumber by controlling Na+ exclusion and stomatal closure

 

C2016-003,張明才,中國農(nóng)業(yè)大學,J EXP BOT,根,Na+/K+/H+

Increased abscisic acid levels in transgenic maize overexpressing AtLOS5 mediated root ion fluxes and leaf water status under salt stress

 

C2016-002,柳參奎,東北林業(yè)大學,PLANT BIOTECHNOL J,根,Na+

Conserved V-ATPase c subunit plays a role in plant growth by influencing V-ATPase-dependent endosomal trafficking

 

C2015-032,鄭海雷,廈門大學,Scientific Reports,根,Na+/K+

Hydrogen sulfide enhances salt tolerance through nitric oxide mediated maintenance of ion homeostasis in barley seedling roots

 

C2015-030,張洪霞,中科院上海植物生理生態(tài)研究所,PLANT BIOTECHNOL J,根,Na+

Overexpression of the PtSOS2 gene improves tolerance to salt stress in transgenic poplar plants

 

C2015-005,種康,中科院植物所,Cell,根,Ca2+

COLD1 Confers Chilling Tolerance in Rice

 

F2015-008,PLANT CELL ENVIRON ,黃藻,H+/K+ Na+

Mechanisms underlying turgor regulation in the estuarine alga Vaucheria erythrospora (Xanthophyceae) exposed to hyperosmotic shock

 

F2014-006,PLANT CELL ENVIRON ,根木質(zhì)部,K+

Kinetics of xylem loading, membrane potential maintenance,and sensitivity of K+-permeable channels to reactive oxygen species: physiological traits that differentiate salinity tolerance between pea and barley

 

C2013-021,余迪求,中科院西雙版納熱帶植物園,Plant Journal,根,K+

Arabidopsis transcription factor WRKY8 functions antagonistically with its interacting partner VQ9 to modulate salinity stress tolerance

 

C2012-020,魏建華,北京市農(nóng)林科學院,PLANT CELL ENVIRON ,根,K+/H+

HbCIPK2, a novel CBL-interacting protein kinase from halophyte Hordeum brevisubulatum, confers salt and osmotic stress tolerance

 

C2012-010,陳少良,北京林業(yè)大學,Plant Physiology,根尖,Na+/K+/H+/Ca2+

Paxillus involutus strains MAJ and NAU mediate K+/Na+ homeostasis in ectomycorrhizal Populus × canescens under NaCl stress

 

C2010-004,陳少良,北京林業(yè)大學,PLANT CELL ENVIRON ,愈傷組織細胞,Na+/K+/H+/Ca2+

H2O2 and cytosolic Ca2+ signals triggered by the PM H+-coupled transport system mediate K+/Na+ homeostasis in NaCl-stressed Populus euphratica cells

 

C2010-002,郭巖,北京生命科學研究所,Plant Cell,根,H+

The Arabidopsis chaperone J3 regulates the plasma membrane H+-ATPase through interaction with the PKS5 kinase

 

C2009-004,陳少良,北京林業(yè)大學,Plant Physiology,根,Na+/Cl-/H+

NaCl-induced alternations of cellular and tissue ion fluxes in roots of salt-resistant and salt-sensitive poplar species

三、常測哪些指標

1、直接相關(guān)
Na+、K+、Ca2+、H+、Cl-

2、間接相關(guān)

Mg2+、NO3-、NH4+、Cd2+

四、檢測這些離子流、分子流,有什么生物學意義

  • 1)K+生理功能概述

    2)科研案例

    a.案例1

           與野生型擬南芥相比,wrky8-1突變體在鹽脅迫下K+外排更明顯,而vq9突變體的K+外排速率更低,為WRKY8與VQ9基因參與調(diào)控植物在鹽脅迫下的 Na+/K+離子動態(tài)平衡提供了直接有效的證據(jù)。

    Hu Y et al. Arabidopsis transcription factor WRKY8 functions antagonistically with its interacting partner VQ9 to modulate salinity stress tolerance. Plant J. 2013;74(5):730-745.

     

    ganhanxiepo1

     

    b.案例2

           以中國春、洲元9369和長武134等3種耐鹽性不同小麥品種為材料, 采用非損傷微測技術(shù)檢測鹽脅迫2 d后的根系K+離子流變化。結(jié)果表明鹽脅迫下, 小麥根際的K+大量外流, 鹽敏感品種中國春K+流速顯著高于耐鹽品種長武134。另外,通過對植株體內(nèi)的Na+、K+含量進行測定,共同發(fā)現(xiàn)鹽脅迫下造成小麥組織器官中Na+/K+比上升的主要原因是根系K+大量外流和Na+的過量積累, 耐鹽性不同的小麥品種間差異顯著, 并認為根系對K+的保有能力可能是作物耐鹽性評價的一個重要指標。

    王曉冬,王成,馬智宏,侯瑞鋒,高權(quán),陳泉.短期NaCl脅迫對不同小麥品種幼苗K+吸收和Na+、K+積累的影響.生態(tài)學報,2011,31(10):2822-2830.

     

    ganhanxiepo2

  • 1)Na2+生理功能概述

    2)科研案例

    a.案例1

           研究利用非損傷微測系統(tǒng)(NMT),檢測了PtVP1.1高表達白楊與野生型經(jīng)0/150 mM NaCl處理后,根部分生區(qū)、伸長區(qū)、成熟區(qū)的Na+、H+流速。結(jié)果顯示,正常生長環(huán)境下,兩組樣品根部Na+流速無差異,對照組H+吸收速率更高。鹽脅迫時,PtVP1.1高表達白楊相比于野生型,其根部具更強的排Na+吸H+能力(Na+外排速率、H+吸收速率均高與野生型)。這一結(jié)果為PtVP1.1提升木本植物耐鹽性提供了活體生理證據(jù)。

    Yang Y et al. Overexpression of a Populus trichocarpa H+-pyrophosphatase gene PtVP1.1 confers salt tolerance on transgenic poplar. Tree Physiol. 2015;35(6):663-677.

     

    ganhanxiepo3

    b.案例2

           北京林業(yè)大學陳少良實驗室NMT測定了抗鹽品種胡楊和鹽敏感型品種群眾楊根、細胞和原生質(zhì)體的H+、Na+和Cl-流速,比較了短期處理和長期處理后兩個品種間排Na+的能力。長期脅迫導致根原生質(zhì)體Na+外流增加,H+內(nèi)流增加。這種NaCl誘導的Na+/H+交換被Amiloride和礬酸鈉抑制,說明脅迫后胡楊Na+的排出是Na+/H+逆向轉(zhuǎn)運體主動跨膜的結(jié)果。

    Sun J et al. NaCl-induced alternations of cellular and tissue ion fluxes in roots of salt-resistant and salt-sensitive poplar species. Plant Physiol. 2009;149(2):1141-1153.

     

    ganhanxiepo4

  • 1)Ca+生理功能概述

    2)科研案例

    a.案例1

           NaCl處理1-2min后觀察到煙草根部伸長區(qū)有瞬時的Ca2+外排現(xiàn)象,NaCl處理24h后,觀察到Ca2+內(nèi)流,低濃度的甜菜堿則會顯著的增加NaCl誘導的Ca2+內(nèi)流。加上對相關(guān)基因表達的測定、Ca2+含量的測定等內(nèi)容,表明在NaCl誘導的Ca2+滲透流中,甜菜堿起到了輔助因子的作用。

    Li M et al. Glycine betaine-mediated potentiation of HSP gene expression involves calcium signaling pathways in tobacco exposed to NaCl stress. Physiol Plant. 2014;150(1):63-75.

     

    ganhanxiepo5

    b.案例2

           本試驗以油用向日葵鹽敏感品種‘YK18’、中度耐鹽品種‘YK06’和耐鹽品種‘GF01’為試驗材料,利用離子流檢測技術(shù), 動態(tài)監(jiān)測了復(fù)合鹽脅迫24 h后植株根系的 K+、Na+、Ca2+等離子的流速流向,結(jié)果表明,鹽脅迫下向日葵幼苗根系Ca2+的吸收速率加快,‘GF01’是‘YK18’的2倍。結(jié)合種子萌發(fā)和離子在萌發(fā)幼苗中積累分布情況的實驗結(jié)果發(fā)現(xiàn),不同耐鹽性的油用向日葵植株在鹽脅迫下可通過調(diào)節(jié)Na+、K+和Ca2+的吸收與外排來適應(yīng)鹽脅迫環(huán)境,為鹽堿地耐鹽品種篩選和栽培提供理論依據(jù)。

    馬榮,王成,馬慶,侯佩臣,王曉冬.向日葵芽苗期離子對復(fù)合鹽脅迫的響應(yīng).中國生態(tài)農(nóng)業(yè)學報,2017,25(05):720-729.

     

    ganhanxiepo6

  • 1)H+生理功能概述

    2)科研案例

    a.案例1

           研究采用了同一品種的二倍體及四倍體水稻,分別培養(yǎng)在含有0、150 mM NaCl的1/2 MS培養(yǎng)基中。利用非損傷微測技術(shù),檢測了各組樣品根部距離根尖0-5000 μm范圍的H+流速。結(jié)果顯示,距離根尖0-1000 μm范圍內(nèi),兩組樣品H+流速沒有差異,而且在500-1000 μm之間,H+表現(xiàn)為吸收。從距離根尖1000 μm的位點開始至2000 μm,H+外排趨勢逐漸增大并達到穩(wěn)定值。二倍體與四倍體根尖H+流速對比顯示,1000-5000 μm區(qū)間內(nèi),后者H+外排速率顯著高于前者,這也間接反映了四倍體植株的根內(nèi)pH較二倍體低。研究認為,基因組重復(fù)可提升水稻耐鹽能力,而這一現(xiàn)象可能與四倍體水稻加強了H+外排至根表面從而減少Na+的進入根部有關(guān)。

    Tu Y, Jiang A, Gan L, et al. Genome duplication improves rice root resistance to salt stress. Rice (N Y). 2014;7(1):15.

     

    ganhanxiepo8

    b.案例2

           當植物缺乏J3時對外部的鹽堿脅迫超敏感,質(zhì)膜H+-ATPase的活性也下降。使用非損傷微測技術(shù)在活體擬南芥的根部進行了原位測量,證實不同的基因所調(diào)控的H+外排的差異,說明了蛋白之間的相互作用。本研究發(fā)現(xiàn),分子伴侶蛋白J3可以和PKS5相互作用,并且抑制PKS5激酶活性,進而正向調(diào)節(jié)質(zhì)膜H+-ATPase的活性及植物對鹽堿脅迫的反應(yīng)。

    Yang Y, Qin Y, Xie C, et al. The Arabidopsis chaperone J3 regulates the plasma membrane H+-ATPase through interaction with the PKS5 kinase. Plant Cell. 2010;22(4):1313-1332.

    yanxiepo4 42

  • 1)Cl-生理功能概述

    2)科研案例

    a.案例1

           與單個鹽腺相比,二色補血草的氣孔和表皮細胞分泌的Na+、K+和Cl-很少,NaCl處理對它們的分泌率沒有顯著影響。在本研究中,200 mmol/L NaCl處理可顯著提高鹽腺的Cl-分泌率,且NaCl處理的Cl-分泌率是對照組的35倍。結(jié)合Na+通量檢測和ESEM分析等結(jié)果,表明鹽腺通過分泌孔分泌離子,并以Na+和Cl-為主。分泌速率的增加有助于抵消葉片中鹽濃度的增加。分泌的選擇性有助于保持葉片細胞內(nèi)良好的Na+/K+和Cl-/陰離子比值。

    Feng Z , Sun Q , Deng Y , et al. Study on pathway and characteristics of ion secretion of salt glands of Limonium bicolor. Acta Physiologiae Plantarum, 2014, 36(10):2729-2741.

     

    ganhanxiepo9

     

  • 1)Mg2+生理功能概述

    2)科研案例

           影響光合作用,葉綠素的組成成分、酶的活化劑;與糖代謝、氮代謝相關(guān);影響核酸和蛋白質(zhì)代謝;參與脂肪代謝、促進維生素合成。

    例1:以甘薯的兩個品種(耐鹽品種Xu 22和鹽敏感品種Shi 5)為實驗材料,對其在NaCl脅迫下的K+、Cl-、Mg2+等離子進行通量檢測,結(jié)果發(fā)現(xiàn)NaCl促進了Xu 22根系對Mg2+的吸收,但使Shi 5根Mg2+的外排增加。結(jié)合其他離子通量、離子含量、qPCR驗證等實驗結(jié)果,表明,Xu 22不定根期具有較好的K+、Mg2+截留能力、液泡Na+和Cl-固存能力、NH4+/NO3-轉(zhuǎn)運轉(zhuǎn)化能力和N同化維持能力是其耐鹽性的主要原因。

    Yicheng Yu et al. NaCl-induced changes of ion homeostasis and nitrogen metabolism in two sweet potato (Ipomoea batatas L.) cultivars exhibit different salt tolerance at adventitious root stage. Environmental and Experimental Botany, 2016. doi: 10.1016/j.envexpbot.2015.12.006

     

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  • 參見《植物營養(yǎng)研究NMT解決方案》NO3-生理功能概述

     

     

五、可以檢測哪些樣品

點擊查看具體信息

點擊查看樣品照片

 

1、動物樣品

1)細胞

神經(jīng)細胞、腫瘤細胞、巨噬細胞、淋巴細胞等

2)組織器官

腫瘤、皮膚、胃粘膜、胰島、腦(海馬體等)、胚胎(大鼠、魚)、斑馬魚皮膚/、耳蝸、心臟(香螺)、卵(魚、雞蛋、爪蟾)、骨骼、角膜、脊椎(豚鼠)、肌肉組織(肌纖維、心?。?/p>

3)其它動物樣品

珊瑚、螨蟲、昆蟲(果蠅幼蟲的腸、蟑螂血腦屏障、按蚊、長紅錐蝽)、蝌蚪、水蛭、藍蟹(微感毛)、變形蟲、水絲蚓

2、植物樣品

1)營養(yǎng)器官

根:、根毛、根瘤*

莖:邊材、心材、微管形成層、木質(zhì)部

葉:表皮細胞、葉肉細胞、鹽腺細胞、保衛(wèi)細胞

2)生殖器官

花:花瓣、花瓣表皮細胞、花粉

種子:整體、胚

果實:果殼、果皮、果肉(蘋果、柑橘)、籽粒、棉花纖維、棉桃

3)細胞:植物懸浮細胞、液泡

4)愈傷組織

3、微生物樣品

酵母細胞、菌絲、菌落、微藻、細菌(大腸桿菌)

4、其它生物樣品

周叢生物

5、非生物樣品

金屬、混凝土、泥沙、納米材料、生物醫(yī)藥材料

六、樣品需要做哪些前處理

國際領(lǐng)先的非損傷微測技術(shù)最大的特點就是活體、無損檢測,因此動植物材料在檢測前,不需要任何的液氮速凍、染色、研磨處理等。

1、動物單細胞

因NMT是活體檢測,故從培養(yǎng)箱中拿出來后,置于培養(yǎng)皿中,直接檢測即可。

2、動物組織

因NMT是活體檢測,無需提前處理。如檢測部位天然暴露在外,如斑馬魚皮膚離子細胞、側(cè)線毛細胞,直接檢測即可。如檢測部位位于體內(nèi),需在檢測時暴露出檢測部位(可采用麻醉的方式),后檢測即可。

3、植物根莖葉等組織器官

天然暴露在外的組織器官,例如根、莖、葉的表面,無需任何處理,直接檢測即可。水培、土培、砂培、平板培養(yǎng)均可。

4、植物原生質(zhì)體/液泡

因NMT是基于微傳感器/探針的非損傷檢測,檢測時不接觸樣品,故原生質(zhì)體、液泡需要從組織或者細胞中,提取出來后檢測。

5、植物葉片的表皮細胞、葉肉細胞、鹽腺細胞、保衛(wèi)細胞

無需提前處理。因這些細胞處于組織內(nèi)部,故檢測時采用撕取等方式,暴露出相應(yīng)細胞即可。

6、植物花粉管

離體萌發(fā):在培養(yǎng)皿中萌發(fā)一段時間后即可直接檢測;在體萌發(fā):將柱頭置于培養(yǎng)皿中,待萌發(fā)一段時間后即可直接檢測。

7、植物果實

無需提前處理。如待測部位位于果實內(nèi)部,需在檢測前暴露出相應(yīng)部位即可。

8、植物懸浮細胞

無需提前處理。檢測時,置于培養(yǎng)皿中檢測即可。

七、有哪些檢測方式?

1、實時處理 /瞬時處理后檢測

即瞬時處理,是指在檢測過程中,在正常測試液中瞬間加入所需的干旱脅迫溶液(PEG或甘露醇等溶液)的處理方法,目的是為了觀察瞬間干旱脅迫下,樣品短時間內(nèi)的離子/分子的變化趨勢,即短時效應(yīng)。

2、預(yù)處理/提前處理好后檢測

是指在干旱脅迫一段較長的時間后(數(shù)十分鐘/數(shù)小時/數(shù)天),觀察植物離子/分子進出的情況,即長時效應(yīng)。

八、檢測環(huán)境是空氣還是溶液

檢測時,只要求待測部位浸于溶液中(無需整體都浸在溶液里)。

九、樣品是如何檢測的

十、可以送樣檢測嗎

可以送樣檢測。目前非損傷微測技術(shù)測試服務(wù)由中關(guān)村NMT產(chǎn)業(yè)聯(lián)盟統(tǒng)籌管理,由遍布全國的25家NMT創(chuàng)新平臺服務(wù)中心,提供檢測服務(wù)。點擊獲取測試服務(wù)

Ceshifuwuwangluo

十一、哪里能獲取非損傷微測系統(tǒng)操作培訓服務(wù)

請直接聯(lián)系旭月公司獲取設(shè)備操作培訓服務(wù)。點擊此處查看培訓服務(wù)介紹

聯(lián)系人:巨肖宇

電話:010-8262 2628按3

十二、如何購買實驗耗材(自行檢測)

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中關(guān)村NMT產(chǎn)業(yè)聯(lián)盟 younger xbi wsi10 lmtx bjgxdxsjycyxxw

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