極性生長研究NMT標(biāo)準(zhǔn)化方案
極性生長研究NMT標(biāo)準(zhǔn)化方案
一、視頻資源
二、參考文獻(xiàn)
F2018-001，Science，花粉管，Ca2+
CORNICHON sorting and regulation of GLR channels underlie pollen tube Ca2+ homeostasis
C2014-010，孫蒙祥，武漢大學(xué)，J EXP BOT，花粉管，Ca2+
Exogenous γ-aminobutyric acid affects pollen tube growth via modulating putative Ca2+-permeable membrane channels and is coupled to negative regulation on glutamate decarboxylase
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C2014-006，宋純鵬，河南大學(xué)，Plant Cell，根毛/液泡，NH4+/Ca2+
A Receptor-Like Kinase Mediates Ammonium Homeostasis and Is Important for the Polar Growth of Root Hairs in Arabidopsis
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C2014-004，涂禮莉，華中農(nóng)業(yè)大學(xué)，PLANT BIOTECHNOL J，纖維細(xì)胞，K+
A peptide hormone gene, GhPSK promotes fibre elongation and contributes to longer and finer cotton fibre
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C2014-003，張獻(xiàn)龍/涂禮莉，華中農(nóng)業(yè)大學(xué)，New Phytologist，纖維細(xì)胞，Ca2+
The calcium sensor GhCaM7 promotes cotton fiber elongation by modulating reactive oxygen species (ROS) production
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C2012-013，林金星，中科院植物研究所，Plant Cell，根，IAA
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F2011-020，J EXP BOT，花粉管，Cl-
The essential role of anionic transport in plant cells: the pollen tube as a case study
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F2011-009，Science，花粉管，Ca2+
Glutamate Receptor–Like Genes Form Ca2+ Channels in Pollen Tubes and Are Regulated by Pistil D-Serine
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C2009-007，林金星，中科院植物研究所，Plant Physiology，花粉管，Ca2+
Combined proteomic and cytological analysis of Ca2+-calmodulin regulation in Picea meyeri pollen tube growth
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C2009-002，林金星，中科院植物研究所，New Phytologist，花粉管，Ca2+
Nitric oxide modulates the influx of extracellular Ca2+ and actin filament organization during cell wall construction in Pinus bungeana pollen tubes
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三、常測哪些指標(biāo)
Ca2+、H+
四、檢測這些離子流、分子流，有什么生物學(xué)意義
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2）科研案例
檢測野生型（Col-0）和不同種類突變體的擬南芥花粉管尖端Ca2+吸收速率，結(jié)果顯示，花粉管表達(dá)單突變體擬南芥GLR（AtGLRs）表現(xiàn)出生長、花粉管質(zhì)膜Ca2+通道顯示的Ca2+流速；但是，高階突變體AtGLR3.3表現(xiàn)出與假設(shè)相反的現(xiàn)象。結(jié)合其他數(shù)據(jù)結(jié)果共同揭示了一種機制，即 AtCNIHs 引發(fā) AtGLRs 的排布和活性變化，從而調(diào)控Ca2+穩(wěn)態(tài)。（Wudick MM, Portes MT, Michard E, et al. CORNICHON sorting and regulation of GLR channels underlie pollen tube Ca2+ homeostasis. Science. 2018;360(6388):533-536. doi:10.1126/science.aar6464）
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1）H+生理功能概述
2）科研案例
使用雙探針同時測試系統(tǒng)同時測量百合花粉管的H+和O2通量，結(jié)果表明，H+外排而氧O2內(nèi)流，并且它們在本構(gòu)堿性帶區(qū)域周圍彼此緊密相關(guān)。特別是，當(dāng)H+外排量增加時，O2流入量也增加。因此，Hepler小組提出的花粉管堿化區(qū)存在濃縮活性線粒體的假說得到了支持。
五、可以檢測哪些樣品
1、動物樣品
1）細(xì)胞
神經(jīng)細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞等
2）組織器官
腫瘤、皮膚、胃粘膜、胰島、腦（海馬體等）、胚胎（大鼠、魚）、斑馬魚皮膚/鰓、耳蝸、心臟（香螺）、卵（魚、雞蛋、爪蟾）、骨骼、角膜、脊椎（豚鼠）、肌肉組織（肌纖維、心?。?/p>
3）其它動物樣品
珊瑚、螨蟲、昆蟲（果蠅幼蟲的腸、蟑螂血腦屏障、按蚊、長紅錐蝽）、蝌蚪、水蛭、藍(lán)蟹（微感毛）、變形蟲、水絲蚓
2、植物樣品
1）營養(yǎng)器官
莖：邊材、心材、微管形成層、木質(zhì)部
葉：表皮細(xì)胞、葉肉細(xì)胞、鹽腺細(xì)胞、保衛(wèi)細(xì)胞
2）生殖器官
花：花瓣、花瓣表皮細(xì)胞、花粉
種子：整體、胚
果實：果殼、果皮、果肉（蘋果、柑橘）、籽粒、棉花纖維、棉桃
3）細(xì)胞：植物懸浮細(xì)胞、液泡
4）愈傷組織
3、微生物樣品
酵母細(xì)胞、菌絲、菌落、微藻、細(xì)菌（大腸桿菌）
4、其它生物樣品
周叢生物
5、非生物樣品
金屬、混凝土、泥沙、納米材料、生物醫(yī)藥材料
六、樣品需要做哪些前處理
國際領(lǐng)先的非損傷微測技術(shù)最大的特點就是活體、無損檢測，因此動植物材料在檢測前，不需要任何的液氮速凍、染色、研磨處理等。
1、動物單細(xì)胞
因NMT是活體檢測，故從培養(yǎng)箱中拿出來后，置于培養(yǎng)皿中，直接檢測即可。
2、動物組織
因NMT是活體檢測，無需提前處理。如檢測部位天然暴露在外，如斑馬魚皮膚離子細(xì)胞、側(cè)線毛細(xì)胞，直接檢測即可。如檢測部位位于體內(nèi)，需在檢測時暴露出檢測部位（可采用麻醉的方式），后檢測即可。
3、植物根莖葉等組織器官
天然暴露在外的組織器官，例如根、莖、葉的表面，無需任何處理，直接檢測即可。水培、土培、砂培、平板培養(yǎng)均可。
4、植物原生質(zhì)體/液泡
因NMT是基于微傳感器/探針的非損傷檢測，檢測時不接觸樣品，故原生質(zhì)體、液泡需要從組織或者細(xì)胞中，提取出來后檢測。
5、植物葉片的表皮細(xì)胞、葉肉細(xì)胞、鹽腺細(xì)胞、保衛(wèi)細(xì)胞
無需提前處理。因這些細(xì)胞處于組織內(nèi)部，故檢測時采用撕取等方式，暴露出相應(yīng)細(xì)胞即可。
6、植物花粉管
離體萌發(fā)：在培養(yǎng)皿中萌發(fā)一段時間后即可直接檢測；在體萌發(fā)：將柱頭置于培養(yǎng)皿中，待萌發(fā)一段時間后即可直接檢測。
7、植物果實
無需提前處理。如待測部位位于果實內(nèi)部，需在檢測前暴露出相應(yīng)部位即可。
8、植物懸浮細(xì)胞
無需提前處理。檢測時，置于培養(yǎng)皿中檢測即可。
七、有哪些檢測方式？
即瞬時處理，是指在檢測過程中，在正常測試液中瞬間加入所需的干旱脅迫溶液（PEG或甘露醇等溶液）的處理方法，目的是為了觀察瞬間干旱脅迫下，樣品短時間內(nèi)的離子/分子的變化趨勢，即短時效應(yīng)。
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2、預(yù)處理/提前處理好后檢測
是指在干旱脅迫一段較長的時間后（數(shù)十分鐘/數(shù)小時/數(shù)天），觀察植物離子/分子進(jìn)出的情況，即長時效應(yīng)。
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八、檢測環(huán)境是空氣還是溶液
檢測時，只要求待測部位浸于溶液中（無需整體都浸在溶液里）。
九、樣品是如何檢測的
十、可以送樣檢測嗎
可以送樣檢測。目前非損傷微測技術(shù)測試服務(wù)由中關(guān)村NMT產(chǎn)業(yè)聯(lián)盟統(tǒng)籌管理，由遍布全國的25家NMT創(chuàng)新平臺服務(wù)中心，提供檢測服務(wù)。點擊獲取測試服務(wù)
