互作共生研究NMT標(biāo)準(zhǔn)化方案
互作共生研究NMT標(biāo)準(zhǔn)化方案
一、視頻資源
敬請期待
二、參考文獻(xiàn)
C2018-024,林文雄、李兆偉,福建農(nóng)林大學(xué),Scientific Reports,水稻,Ca2+、K+、H+
Gene mutation associated with esl mediates shifts on fungal community composition in rhizosphere soil of rice at grainfilling stage
C2017-002,F(xiàn)rontiers in Plant Science,陳少良,北京林業(yè)大學(xué),菌根,H+/Ca2+/Cd2+/H2O2
Paxillus involutus-Facilitated Cd2+ Influx through Plasma Membrane Ca2+-Permeable Channels Is Stimulated by H2O2 and H+-ATPase in Ectomycorrhizal Populus × canescens under Cadmium Stress
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F2015-009,Molecular Ecology,菌根,H+/NH4+/NO3-
Species turnover (β diversity) in ectomycorrhizal fungi linked to NH4 (+) uptake capacity
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C2014-021,ENVIRON EXP BOT,陳少良,北京林業(yè)大學(xué),根,H+/Na+/K+/Ca2+
Ion fluxes in Paxillus involutus-inoculated roots of Populus × canescensunder saline stress
C2014-012,Mycorrhiza,吳強(qiáng)盛,長江大學(xué),根,H2O2/ Ca2+?
C2013-015,PLANT CELL ENVIRON ,羅志斌,西北農(nóng)林科技大學(xué),根,Cd2+/H+?
Ectomycorrhizas with Paxillus involutus enhance cadmium uptake and tolerance in Populus × canescens
C2012-010,Plant Physiology,陳少良,北京林業(yè)大學(xué),根/真菌團(tuán),Na+/K+/H+/Ca2+?
F2009-001,New Phytologist,根,H+
F2008-019,New Phytologist,叢枝菌根真菌,H+?
Proton (H+) flux signature for the presymbiotic development of the arbuscular mycorrhizal fungi
F2008-018,Plant Signaling & Behavior,叢枝菌根真菌,H+?
pH signature for the responses of arbuscular mycorrhizal fungi to external stimuli
三、常測哪些指標(biāo)
Ca2+、H+、K+、Na+、NO3-、NH4+、Cd2+
四、檢測這些離子流、分子流,有什么生物學(xué)意義
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2)科研案例
從AM真菌Glomus intraradices中克隆了兩個(gè)水通道基因GintAQPF1和GintAQPF2。使用NMT測定了畢赤酵母的Ca2+和H+流速,發(fā)現(xiàn)25%的PEG促進(jìn)了轉(zhuǎn)染GintAQPF1和GintAQPF2基因的Ca2+內(nèi)流和H+外流,1M的甘油抑制了Ca2+內(nèi)流和H+外流,說明這兩個(gè)水通道蛋白具有調(diào)控Ca2+信號和質(zhì)子外排的作用,進(jìn)一步證實(shí)了水通道蛋白的功能,尤其是在活體中的功能。
Li T, Hu YJ, Hao ZP, Li H, Wang YS, Chen BD. First cloning and characterization of two functional aquaporin genes from an arbuscular mycorrhizal fungus Glomus intraradices. New Phytol. 2013;197(2):617-630.
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1)H+生理功能概述
2)科研案例
把叢枝菌根真菌(GM)和慢生大豆根瘤菌(BJ)注射到大豆苗中,通過原位的非損傷微測技術(shù)研究了兩種真菌單獨(dú)的作用和相互作用對根瘤或者根外菌絲的H+外流。GM把真菌菌根側(cè)根根瘤的H+外流提高了3倍,BJ把側(cè)根接近根瘤部位菌絲的H+外流提高了8倍。植物P含量的增加與根瘤和菌絲的H+外流呈顯著的線性正相關(guān)。研究結(jié)果認(rèn)為側(cè)根AM真菌誘導(dǎo)了固氮酶的活性,增加了根瘤的H+外流,對進(jìn)一步研究植物固氮和P的作用提供了依據(jù)。
Ding X, Sui X, Wang F, et al. Synergistic interactions between Glomus mosseae and Bradyrhizobium japonicum in enhancing proton release from nodules and hyphae. Mycorrhiza. 2012;22(1):51-58.
五、可以檢測哪些樣品
1、動物樣品
1)細(xì)胞
神經(jīng)細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞等
2)組織器官
腫瘤、皮膚、胃粘膜、胰島、腦(海馬體等)、胚胎(大鼠、魚)、斑馬魚皮膚/鰓、耳蝸、心臟(香螺)、卵(魚、雞蛋、爪蟾)、骨骼、角膜、脊椎(豚鼠)、肌肉組織(肌纖維、心?。?/p>
3)其它動物樣品
珊瑚、螨蟲、昆蟲(果蠅幼蟲的腸、蟑螂血腦屏障、按蚊、長紅錐蝽)、蝌蚪、水蛭、藍(lán)蟹(微感毛)、變形蟲、水絲蚓
2、植物樣品
1)營養(yǎng)器官
莖:邊材、心材、微管形成層、木質(zhì)部
葉:表皮細(xì)胞、葉肉細(xì)胞、鹽腺細(xì)胞、保衛(wèi)細(xì)胞
2)生殖器官
花:花瓣、花瓣表皮細(xì)胞、花粉
種子:整體、胚
果實(shí):果殼、果皮、果肉(蘋果、柑橘)、籽粒、棉花纖維、棉桃
3)細(xì)胞:植物懸浮細(xì)胞、液泡
4)愈傷組織
3、微生物樣品
酵母細(xì)胞、菌絲、菌落、微藻、細(xì)菌(大腸桿菌)
4、其它生物樣品
周叢生物
5、非生物樣品
金屬、混凝土、泥沙、納米材料、生物醫(yī)藥材料
六、樣品需要做哪些前處理
國際領(lǐng)先的非損傷微測技術(shù)最大的特點(diǎn)就是活體、無損檢測,因此動植物材料在檢測前,不需要任何的液氮速凍、染色、研磨處理等。
1、動物單細(xì)胞
因NMT是活體檢測,故從培養(yǎng)箱中拿出來后,置于培養(yǎng)皿中,直接檢測即可。
2、動物組織
因NMT是活體檢測,無需提前處理。如檢測部位天然暴露在外,如斑馬魚皮膚離子細(xì)胞、側(cè)線毛細(xì)胞,直接檢測即可。如檢測部位位于體內(nèi),需在檢測時(shí)暴露出檢測部位(可采用麻醉的方式),后檢測即可。
3、植物根莖葉等組織器官
天然暴露在外的組織器官,例如根、莖、葉的表面,無需任何處理,直接檢測即可。水培、土培、砂培、平板培養(yǎng)均可。
4、植物原生質(zhì)體/液泡
因NMT是基于微傳感器/探針的非損傷檢測,檢測時(shí)不接觸樣品,故原生質(zhì)體、液泡需要從組織或者細(xì)胞中,提取出來后檢測。
5、植物葉片的表皮細(xì)胞、葉肉細(xì)胞、鹽腺細(xì)胞、保衛(wèi)細(xì)胞
無需提前處理。因這些細(xì)胞處于組織內(nèi)部,故檢測時(shí)采用撕取等方式,暴露出相應(yīng)細(xì)胞即可。
6、植物花粉管
離體萌發(fā):在培養(yǎng)皿中萌發(fā)一段時(shí)間后即可直接檢測;在體萌發(fā):將柱頭置于培養(yǎng)皿中,待萌發(fā)一段時(shí)間后即可直接檢測。
7、植物果實(shí)
無需提前處理。如待測部位位于果實(shí)內(nèi)部,需在檢測前暴露出相應(yīng)部位即可。
8、植物懸浮細(xì)胞
無需提前處理。檢測時(shí),置于培養(yǎng)皿中檢測即可。
七、有哪些檢測方式?
1、實(shí)時(shí)處理 /瞬時(shí)處理后檢測
即瞬時(shí)處理,是指在檢測過程中,在正常測試液中瞬間加入所需的干旱脅迫溶液(PEG或甘露醇等溶液)的處理方法,目的是為了觀察瞬間干旱脅迫下,樣品短時(shí)間內(nèi)的離子/分子的變化趨勢,即短時(shí)效應(yīng)。
2、預(yù)處理/提前處理好后檢測
是指在干旱脅迫一段較長的時(shí)間后(數(shù)十分鐘/數(shù)小時(shí)/數(shù)天),觀察植物離子/分子進(jìn)出的情況,即長時(shí)效應(yīng)。
八、檢測環(huán)境是空氣還是溶液
檢測時(shí),只要求待測部位浸于溶液中(無需整體都浸在溶液里)。
九、樣品是如何檢測的
十、可以送樣檢測嗎
可以送樣檢測。目前非損傷微測技術(shù)測試服務(wù)由中關(guān)村NMT產(chǎn)業(yè)聯(lián)盟統(tǒng)籌管理,由遍布全國的25家NMT創(chuàng)新平臺服務(wù)中心,提供檢測服務(wù)。點(diǎn)擊獲取測試服務(wù)
十一、哪里能獲取非損傷微測系統(tǒng)操作培訓(xùn)服務(wù)
請直接聯(lián)系旭月公司獲取設(shè)備操作培訓(xùn)服務(wù)。點(diǎn)擊此處查看培訓(xùn)服務(wù)介紹
聯(lián)系人:巨肖宇
電話:010-8262 2628按3