腫瘤研究NMT標(biāo)準(zhǔn)化方案
腫瘤研究NMT標(biāo)準(zhǔn)化方案
一、視頻資源
二、參考文獻(xiàn)
三、常測哪些指標(biāo)
Ca2+、H+、O2、Cl-、K+
四、檢測這些離子流、分子流,有什么生物學(xué)意義
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1)H+生理功能概述
2)科研案例
使用非損傷微測技術(shù)建立了藥物抗性研究方法(drug resistance study method,DRSM),該方法可用于研究器官、組織、細(xì)胞外離子、分子活性與腫瘤細(xì)胞耐藥性之間的相互關(guān)系。結(jié)果表明存在一個持續(xù)的并以固有振蕩形式出現(xiàn)的胞外H+流現(xiàn)象。耐藥株H+流在加ADR(阿霉素)前趨近于零,而敏感株H+呈明顯內(nèi)流。敏感株和耐藥株加ADR后H+均呈外流,但耐藥株的H+外流為敏感株5倍。與H+流速結(jié)果相一致的是胞外的pH也產(chǎn)生了相應(yīng)的改變。本研究為胞外H+活性與腫瘤耐藥性的相互關(guān)聯(lián)提供了直接證據(jù)。
宋瑾,唐勇,許越.用非損傷微測技術(shù)研究腫瘤細(xì)胞的耐藥性與其胞外H+流變化的相關(guān)性.生物物理學(xué)報,2008(03):191-197.
五、可以檢測哪些樣品
1、動物樣品
1)細(xì)胞
神經(jīng)細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞等
2)組織器官
腫瘤、皮膚、胃粘膜、胰島、腦(海馬體等)、胚胎(大鼠、魚)、斑馬魚皮膚/鰓、耳蝸、心臟(香螺)、卵(魚、雞蛋、爪蟾)、骨骼、角膜、脊椎(豚鼠)、肌肉組織(肌纖維、心?。?/p>
3)其它動物樣品
珊瑚、螨蟲、昆蟲(果蠅幼蟲的腸、蟑螂血腦屏障、按蚊、長紅錐蝽)、蝌蚪、水蛭、藍(lán)蟹(微感毛)、變形蟲、水絲蚓
2、植物樣品
1)營養(yǎng)器官
莖:邊材、心材、微管形成層、木質(zhì)部
葉:表皮細(xì)胞、葉肉細(xì)胞、鹽腺細(xì)胞、保衛(wèi)細(xì)胞
2)生殖器官
花:花瓣、花瓣表皮細(xì)胞、花粉
種子:整體、胚
果實:果殼、果皮、果肉(蘋果、柑橘)、籽粒、棉花纖維、棉桃
3)細(xì)胞:植物懸浮細(xì)胞、液泡
4)愈傷組織
3、微生物樣品
酵母細(xì)胞、菌絲、菌落、微藻、細(xì)菌(大腸桿菌)
4、其它生物樣品
周叢生物
5、非生物樣品
金屬、混凝土、泥沙、納米材料、生物醫(yī)藥材料
六、樣品需要做哪些前處理
國際領(lǐng)先的非損傷微測技術(shù)最大的特點就是活體、無損檢測,因此動植物材料在檢測前,不需要任何的液氮速凍、染色、研磨處理等。
1、動物單細(xì)胞
因NMT是活體檢測,故從培養(yǎng)箱中拿出來后,置于培養(yǎng)皿中,直接檢測即可。
2、動物組織
因NMT是活體檢測,無需提前處理。如檢測部位天然暴露在外,如斑馬魚皮膚離子細(xì)胞、側(cè)線毛細(xì)胞,直接檢測即可。如檢測部位位于體內(nèi),需在檢測時暴露出檢測部位(可采用麻醉的方式),后檢測即可。
3、植物根莖葉等組織器官
天然暴露在外的組織器官,例如根、莖、葉的表面,無需任何處理,直接檢測即可。水培、土培、砂培、平板培養(yǎng)均可。
4、植物原生質(zhì)體/液泡
因NMT是基于微傳感器/探針的非損傷檢測,檢測時不接觸樣品,故原生質(zhì)體、液泡需要從組織或者細(xì)胞中,提取出來后檢測。
5、植物葉片的表皮細(xì)胞、葉肉細(xì)胞、鹽腺細(xì)胞、保衛(wèi)細(xì)胞
無需提前處理。因這些細(xì)胞處于組織內(nèi)部,故檢測時采用撕取等方式,暴露出相應(yīng)細(xì)胞即可。
6、植物花粉管
離體萌發(fā):在培養(yǎng)皿中萌發(fā)一段時間后即可直接檢測;在體萌發(fā):將柱頭置于培養(yǎng)皿中,待萌發(fā)一段時間后即可直接檢測。
7、植物果實
無需提前處理。如待測部位位于果實內(nèi)部,需在檢測前暴露出相應(yīng)部位即可。
8、植物懸浮細(xì)胞
無需提前處理。檢測時,置于培養(yǎng)皿中檢測即可。
七、有哪些檢測方式?
即瞬時處理,是指在檢測過程中,在正常測試液中瞬間加入所需的干旱脅迫溶液(PEG或甘露醇等溶液)的處理方法,目的是為了觀察瞬間干旱脅迫下,樣品短時間內(nèi)的離子/分子的變化趨勢,即短時效應(yīng)。
2、預(yù)處理/提前處理好后檢測
是指在干旱脅迫一段較長的時間后(數(shù)十分鐘/數(shù)小時/數(shù)天),觀察植物離子/分子進(jìn)出的情況,即長時效應(yīng)。
八、檢測環(huán)境是空氣還是溶液
檢測時,只要求待測部位浸于溶液中(無需整體都浸在溶液里)。
九、樣品是如何檢測的
十、可以送樣檢測嗎
可以送樣檢測。目前非損傷微測技術(shù)測試服務(wù)由中關(guān)村NMT產(chǎn)業(yè)聯(lián)盟統(tǒng)籌管理,由遍布全國的25家NMT創(chuàng)新平臺服務(wù)中心,提供檢測服務(wù)。點擊獲取測試服務(wù)