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微生物NMT標(biāo)準(zhǔn)化方案

微生物NMT標(biāo)準(zhǔn)化方案

一、視頻資源

二、參考文獻(xiàn)

Extracellular polymeric substrates of Chlorella vulgaris F1068 weaken stress of cetyltrimethyl ammonium chloride on ammonium uptake

Microalgae in Microwell Arrays Exhibit Differences with Those in Flasks: Evidence from Growth Rate, Cellular Carotenoid, and Oxygen Production

 

Paxillus involutus-Facilitated Cd2+ Influx through Plasma MembraneCd2+-Permeable Channels Is Stimulated by H2O2 and H+-ATPase in Ectomycorrhizal Populus × canescens under Cadmium Stress

 

Hexavalent chromium induced oxidative stress and apoptosis in Pycnoporus sanguineus

 

The possible role of bacterial signal molecules N-acyl homoserine lactones in the formation of diatom-biofilm (Cylindrotheca sp.)

 

Physiological fluxes and antioxidative enzymes activities of immobilized Phanerochaete chrysosporium loaded with TiO2 nanoparticles after exposure to toxic pollutants in solution

 

Mechanisms underlying turgor regulation in the estuarine alga Vaucheria erythrospora (Xanthophyceae) exposed to hyperosmotic shock

 

Ca2+ Signal Transduction Related to Neutral Lipid Synthesis in an Oil-Producing Green Alga Chlorella sp. C2

 

Responses of Phanerochaete chrysosporium to Toxic Pollutants: Physiological Flux, Oxidative Stress, and Detoxification

 

Surface tip-to-base Ca2+ and H+ ionic fluxes are involved in apical growth and graviperception of the Phycomyces stage I sporangiophore

 

Electrical Phenotypes of Calcium Transport Mutant Strains of a Filamentous Fungus, Neurospora crassa

 

Osmotic adjustment and requirement for sodium in marine protist thraustochytrid

 

Ion transport and osmotic adjustment in Escherichia coli in response to ionic and non-ionic osmotica

 

Cyclopropane fatty acids improve Escherichia coli survival in acidified minimal media by reducing membrane permeability to H+ and enhanced ability to extrude H+

 

Turgor regulation in the osmosensitive cut mutant of Neurospora crassa

 

Ionic currents and ion fluxes in Neurospora crassa hyphae

三、常測哪些指標(biāo)

Cd2+、Cu2+、Pb2+、NH4+、O2、H+、 K+、 Na+、Ca2+

四、檢測這些離子流、分子流,有什么生物學(xué)意義

  • 1)Cd2+、Pb2+、Cu2+生理功能概述

    2)科研案例

           以硅藻為材料,研究硅的有效性對硅藻金屬敏感性的影響。發(fā)現(xiàn)硅饑餓嚴(yán)重影響了對鎘、銅和鉛的耐受性。多個證據(jù)表明富硅細(xì)胞比缺硅細(xì)胞具有更高的金屬吸附和內(nèi)流速率。富硅細(xì)胞通過提高細(xì)胞膜和液泡金屬轉(zhuǎn)運(yùn)體的表達(dá)和抗氧化活性,清除金屬應(yīng)激產(chǎn)生的活性氧,從而對金屬毒性做出響應(yīng)。

    Zhou B, Ma J, Chen F, et al. Mechanisms underlying silicon-dependent metal tolerance in the marine diatom Phaeodactylum tricornutum. Environ Pollut. 2020;262:114331.

     

    Weishengwu1

     

     

  • 1)NH4+生理功能概述

    2)科研案例

           研究了城市污水中新出現(xiàn)的污染物CTAC對小球藻F1068細(xì)胞(人工去除EPS-R)和自然包覆EPS(EPS-C)對NH4+轉(zhuǎn)運(yùn)和吸收的影響。結(jié)果表明,去除EPS可促進(jìn)NH4+的轉(zhuǎn)移和吸收,但EPS的存在使NH4+保持不變,并有效地減弱了CTAC(b0.5mg/L)對NH4+吸收的能力,為藻類EPS在未來基于藻類的污水處理應(yīng)用中在共存的有毒物質(zhì)的轉(zhuǎn)移和吸收養(yǎng)分中的作用提供了見解。

    Li F, Kuang Y, Liu N, Ge F. Extracellular polymeric substrates of Chlorella vulgaris F1068 weaken stress of cetyltrimethyl ammonium chloride on ammonium uptake. Sci Total Environ. 2019;661:678-684.

     

    Weishengwu2

     

  • 1)O2生理功能概述

    2)科研案例

           以小球藻為材料,研究了其對微培養(yǎng)(5種不同的微孔深度,四種直徑水平)的細(xì)胞反應(yīng)。結(jié)果表明,O2的流速隨著深度從10μm增加到100μm逐漸升高,但隨著深度加深到200μm,氧氣流速迅速降低,這實際上是細(xì)胞生理學(xué)和密度的綜合結(jié)果。綜上所述,直徑/深度比約為1的微孔中的細(xì)胞具有最高的比生長率和氧流量。模擬還表明,在直徑與深度比較高的微孔中,傳質(zhì)效果更好。

    Zhang P, Xiao Y, Li Z, Guo J, Lu L. Microalgae in Microwell Arrays Exhibit Differences with Those in Flasks: Evidence from Growth Rate, Cellular Carotenoid, and Oxygen Production. Front Plant Sci. 2018;8:2251. Published 2018 Jan 10. doi:10.3389/fpls.2017.02251

     

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  • 1) Ca2+生理功能概述

    2)科研案例

           利用NMT技術(shù)測定鹽脅迫下,卷邊樁菇的兩種菌株MAJ和NAU的Na+、K+、Ca2+和H+的動態(tài)變化。在短期鹽處理和長期鹽處理下,兩種菌株Na+外流明顯增加,尤以NAU菌絲更加加明顯。卷邊樁菇菌絲的抑制劑的敏感性研究顯示,兩種菌株Na+外排源于Na+/ H+逆向轉(zhuǎn)運(yùn)。在瞬時鹽處理下,兩種菌株都有很強(qiáng)的減少K+外流的能力。在非鹽脅迫下,兩種菌株顯示穩(wěn)定的Ca2+內(nèi)流。因此推斷,在鹽脅迫下,卷邊樁菇真菌所富含的Ca2+有助于宿根共生體通過增強(qiáng)Na+外排和減緩K+流失來協(xié)助宿主植物保持離子平衡的。

    Li J, Bao S, Zhang Y, et al. Paxillus involutus strains MAJ and NAU mediate K(+)/Na(+) homeostasis in ectomycorrhizal Populus x canescens under sodium chloride stress. Plant Physiol. 2012;159(4):1771-1786. doi:10.1104/pp.112.195370

     

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五、可以檢測哪些樣品

點(diǎn)擊查看具體信息

點(diǎn)擊查看樣品照片

 

1、動物樣品

1)細(xì)胞

神經(jīng)細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞等

2)組織器官

腫瘤、皮膚、胃黏膜、胰島、腦(海馬體等)、胚胎(大鼠、魚)、斑馬魚皮膚/、耳蝸、心臟(香螺)、卵(魚、雞蛋、爪蟾)、骨骼、角膜、脊椎(豚鼠)、肌肉組織(肌纖維、心肌)

3)其它動物樣品

珊瑚、螨蟲、昆蟲(果蠅幼蟲的腸、蟑螂血腦屏障、按蚊、長紅錐蝽)、蝌蚪、水蛭、藍(lán)蟹(微感毛)、變形蟲、水絲蚓

2、植物樣品

1)營養(yǎng)器官

根:、根毛、根瘤*

莖:邊材、心材、微管形成層、木質(zhì)部

葉:表皮細(xì)胞、葉肉細(xì)胞、鹽腺細(xì)胞、保衛(wèi)細(xì)胞

2)生殖器官

花:花瓣、花瓣表皮細(xì)胞、花粉

種子:整體、胚

果實:果殼、果皮、果肉(蘋果、柑橘)、籽粒、棉花纖維、棉桃

3)細(xì)胞:植物懸浮細(xì)胞、液泡

4)愈傷組織

3、微生物樣品

酵母細(xì)胞、菌絲、菌落、微藻、細(xì)菌(大腸桿菌)

4、其它生物樣品

周叢生物

5、非生物樣品

金屬、混凝土、泥沙、納米材料、生物醫(yī)藥材料

六、樣品需要做哪些前處理

國際領(lǐng)先的非損傷微測技術(shù)最大的特點(diǎn)就是活體、無損檢測,因此動植物材料在檢測前,不需要任何的液氮速凍、染色、研磨處理等。

1、動物單細(xì)胞

因NMT是活體檢測,故從培養(yǎng)箱中拿出來后,置于培養(yǎng)皿中,直接檢測即可。

2、動物組織

因NMT是活體檢測,無需提前處理。如檢測部位天然暴露在外,如斑馬魚皮膚離子細(xì)胞、側(cè)線毛細(xì)胞,直接檢測即可。如檢測部位位于體內(nèi),需在檢測時暴露出檢測部位(可采用麻醉的方式),后檢測即可。

3、植物根莖葉等組織器官

天然暴露在外的組織器官,例如根、莖、葉的表面,無需任何處理,直接檢測即可。水培、土培、砂培、平板培養(yǎng)均可。

4、植物原生質(zhì)體/液泡

因NMT是基于微傳感器/探針的非損傷檢測,檢測時不接觸樣品,故原生質(zhì)體、液泡需要從組織或者細(xì)胞中,提取出來后檢測。

5、植物葉片的表皮細(xì)胞、葉肉細(xì)胞、鹽腺細(xì)胞、保衛(wèi)細(xì)胞

無需提前處理。因這些細(xì)胞處于組織內(nèi)部,故檢測時采用撕取等方式,暴露出相應(yīng)細(xì)胞即可。

6、植物花粉管

離體萌發(fā):在培養(yǎng)皿中萌發(fā)一段時間后即可直接檢測;在體萌發(fā):將柱頭置于培養(yǎng)皿中,待萌發(fā)一段時間后即可直接檢測。

7、植物果實

無需提前處理。如待測部位位于果實內(nèi)部,需在檢測前暴露出相應(yīng)部位即可。

8、植物懸浮細(xì)胞

無需提前處理。檢測時,置于培養(yǎng)皿中檢測即可。

七、有哪些檢測方式?

1、實時處理 /瞬時處理后檢測

即瞬時處理,是指在檢測過程中,在正常測試液中瞬間加入所需的干旱脅迫溶液(PEG或甘露醇等溶液)的處理方法,目的是為了觀察瞬間干旱脅迫下,樣品短時間內(nèi)的離子/分子的變化趨勢,即短時效應(yīng)。

2、預(yù)處理/提前處理好后檢測

是指在干旱脅迫一段較長的時間后(數(shù)十分鐘/數(shù)小時/數(shù)天),觀察植物離子/分子進(jìn)出的情況,即長時效應(yīng)。

八、檢測環(huán)境是空氣還是溶液

檢測時,只要求待測部位浸于溶液中(無需整體都浸在溶液里)。

九、樣品是如何檢測的

十、可以送樣檢測嗎

可以送樣檢測。目前非損傷微測技術(shù)測試服務(wù)由中關(guān)村NMT產(chǎn)業(yè)聯(lián)盟統(tǒng)籌管理,由遍布全國的25家NMT創(chuàng)新平臺服務(wù)中心,提供檢測服務(wù)。點(diǎn)擊獲取測試服務(wù)

Ceshifuwuwangluo

十一、哪里能獲取非損傷微測系統(tǒng)操作培訓(xùn)服務(wù)

請直接聯(lián)系旭月公司獲取設(shè)備操作培訓(xùn)服務(wù)。點(diǎn)擊此處查看培訓(xùn)服務(wù)介紹

聯(lián)系人:巨肖宇

電話:010-8262 2628按3

十二、如何購買實驗耗材(自行檢測)

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