生物脅迫NMT標(biāo)準(zhǔn)化方案
生物脅迫NMT標(biāo)準(zhǔn)化方案
一、視頻資源
二、參考文獻(xiàn)
三、常測(cè)哪些指標(biāo)
Na+、K+、Ca2+、H+
四、檢測(cè)這些離子流、分子流,有什么生物學(xué)意義
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2)科研案例
食草動(dòng)物暴露通過(guò)激活茉莉酸信號(hào)傳導(dǎo)途徑,增加質(zhì)膜H+-ATPase活性,促進(jìn)[Ca2+] cyt積累,然后限制K+外排并減少Na+在胞質(zhì)中的積累,增強(qiáng)了沙冬青對(duì)鹽脅迫的耐受性。這些變化導(dǎo)致食草動(dòng)物預(yù)處理過(guò)的根在NaCl處理下比無(wú)食草動(dòng)物預(yù)處理的根具有更高的K+/ Na+比。
Chen Y, Cao C, Guo Z, et al. Herbivore exposure alters ion fluxes and improves salt tolerance in a desert shrub. Plant Cell Environ. 2020;43(2):400-419. doi:10.1111/pce.13662
五、可以檢測(cè)哪些樣品
1、動(dòng)物樣品
1)細(xì)胞
神經(jīng)細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞等
2)組織器官
腫瘤、皮膚、胃粘膜、胰島、腦(海馬體等)、胚胎(大鼠、魚(yú))、斑馬魚(yú)皮膚/鰓、耳蝸、心臟(香螺)、卵(魚(yú)、雞蛋、爪蟾)、骨骼、角膜、脊椎(豚鼠)、肌肉組織(肌纖維、心肌)
3)其它動(dòng)物樣品
珊瑚、螨蟲(chóng)、昆蟲(chóng)(果蠅幼蟲(chóng)的腸、蟑螂血腦屏障、按蚊、長(zhǎng)紅錐蝽)、蝌蚪、水蛭、藍(lán)蟹(微感毛)、變形蟲(chóng)、水絲蚓
2、植物樣品
1)營(yíng)養(yǎng)器官
莖:邊材、心材、微管形成層、木質(zhì)部
葉:表皮細(xì)胞、葉肉細(xì)胞、鹽腺細(xì)胞、保衛(wèi)細(xì)胞
2)生殖器官
花:花瓣、花瓣表皮細(xì)胞、花粉
種子:整體、胚
果實(shí):果殼、果皮、果肉(蘋(píng)果、柑橘)、籽粒、棉花纖維、棉桃
3)細(xì)胞:植物懸浮細(xì)胞、液泡
4)愈傷組織
3、微生物樣品
酵母細(xì)胞、菌絲、菌落、微藻、細(xì)菌(大腸桿菌)
4、其它生物樣品
周叢生物
5、非生物樣品
金屬、混凝土、泥沙、納米材料、生物醫(yī)藥材料
六、樣品需要做哪些前處理
國(guó)際領(lǐng)先的非損傷微測(cè)技術(shù)最大的特點(diǎn)就是活體、無(wú)損檢測(cè),因此動(dòng)植物材料在檢測(cè)前,不需要任何的液氮速凍、染色、研磨處理等。
1、動(dòng)物單細(xì)胞
因NMT是活體檢測(cè),故從培養(yǎng)箱中拿出來(lái)后,置于培養(yǎng)皿中,直接檢測(cè)即可。
2、動(dòng)物組織
因NMT是活體檢測(cè),無(wú)需提前處理。如檢測(cè)部位天然暴露在外,如斑馬魚(yú)皮膚離子細(xì)胞、側(cè)線毛細(xì)胞,直接檢測(cè)即可。如檢測(cè)部位位于體內(nèi),需在檢測(cè)時(shí)暴露出檢測(cè)部位(可采用麻醉的方式),后檢測(cè)即可。
3、植物根莖葉等組織器官
天然暴露在外的組織器官,例如根、莖、葉的表面,無(wú)需任何處理,直接檢測(cè)即可。水培、土培、砂培、平板培養(yǎng)均可。
4、植物原生質(zhì)體/液泡
因NMT是基于微傳感器/探針的非損傷檢測(cè),檢測(cè)時(shí)不接觸樣品,故原生質(zhì)體、液泡需要從組織或者細(xì)胞中,提取出來(lái)后檢測(cè)。
5、植物葉片的表皮細(xì)胞、葉肉細(xì)胞、鹽腺細(xì)胞、保衛(wèi)細(xì)胞
無(wú)需提前處理。因這些細(xì)胞處于組織內(nèi)部,故檢測(cè)時(shí)采用撕取等方式,暴露出相應(yīng)細(xì)胞即可。
6、植物花粉管
離體萌發(fā):在培養(yǎng)皿中萌發(fā)一段時(shí)間后即可直接檢測(cè);在體萌發(fā):將柱頭置于培養(yǎng)皿中,待萌發(fā)一段時(shí)間后即可直接檢測(cè)。
7、植物果實(shí)
無(wú)需提前處理。如待測(cè)部位位于果實(shí)內(nèi)部,需在檢測(cè)前暴露出相應(yīng)部位即可。
8、植物懸浮細(xì)胞
無(wú)需提前處理。檢測(cè)時(shí),置于培養(yǎng)皿中檢測(cè)即可。
七、有哪些檢測(cè)方式?
1、實(shí)時(shí)處理 /瞬時(shí)處理后檢測(cè)
即瞬時(shí)處理,是指在檢測(cè)過(guò)程中,在正常測(cè)試液中瞬間加入所需的干旱脅迫溶液(PEG或甘露醇等溶液)的處理方法,目的是為了觀察瞬間干旱脅迫下,樣品短時(shí)間內(nèi)的離子/分子的變化趨勢(shì),即短時(shí)效應(yīng)。
2、預(yù)處理/提前處理好后檢測(cè)
是指在干旱脅迫一段較長(zhǎng)的時(shí)間后(數(shù)十分鐘/數(shù)小時(shí)/數(shù)天),觀察植物離子/分子進(jìn)出的情況,即長(zhǎng)時(shí)效應(yīng)。
八、檢測(cè)環(huán)境是空氣還是溶液
檢測(cè)時(shí),只要求待測(cè)部位浸于溶液中(無(wú)需整體都浸在溶液里)。
九、樣品是如何檢測(cè)的
十、可以送樣檢測(cè)嗎
可以送樣檢測(cè)。目前非損傷微測(cè)技術(shù)測(cè)試服務(wù)由中關(guān)村NMT產(chǎn)業(yè)聯(lián)盟統(tǒng)籌管理,由遍布全國(guó)的25家NMT創(chuàng)新平臺(tái)服務(wù)中心,提供檢測(cè)服務(wù)。點(diǎn)擊獲取測(cè)試服務(wù)
十一、哪里能獲取非損傷微測(cè)系統(tǒng)操作培訓(xùn)服務(wù)
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