河南大學(xué)

主題： CAP1調(diào)節(jié)尖端Ca²⁺流參與根毛NH₄⁺穩(wěn)態(tài)調(diào)節(jié)

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作者

宋純鵬、白玲

研究使用平臺

NMT極性生長創(chuàng)新科研平臺

檢測指標(biāo)

NH₄⁺, Ca²⁺流速

檢測樣品

擬南芥根毛、液泡

離子流/分子流實驗處理方法

Ca²⁺：在MS培養(yǎng)基中培養(yǎng)的7日齡的擬南芥

NH₄⁺：使用7日齡的擬南芥幼苗，首先在1.5％的纖維素RS和0.075％的果膠裂解酶Y-23中消化2-3 h，從根毛區(qū)中分離出根表皮細胞原生質(zhì)體，然后通過洗滌這些原生質(zhì)體釋放液泡，液泡粘附在預(yù)先培養(yǎng)于培養(yǎng)皿中的聚賴氨酸預(yù)處理蓋玻片上。用測試液輕輕沖洗液泡，并在該溶液中穩(wěn)定10分鐘。

測試液成份

Ca²⁺：0.1mM CaCl₂, 0.1mM KCl, 0.1mM MgCl₂, 0.5mM NaCl, 0.2mM Na₂SO₄, 0.3mM MES, 1% sucrose, pH 6.0

NH₄⁺：0.1mM NH₄Cl, 0.1mM KCl, 0.5mM NaCl, 0.1mM CaCl₂, 120mM mannito, 0.05mM MES，pH 7.8

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